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化学发光法(Chemiluminescence)

定义:
是物质在进行化学反应过程中伴随的一种光辐射现象,可以分为直接发光和间接发光。直接发光是最简单的化学发光反应,有两个关键步骤组成:即激发和辐射。如A、B两种物质发生化学反应生成C物质,反应释放的能量被C物质的分子吸收并跃迁至激发态C*,处于激发的C*在回到基态的过程中产生光辐射。这里C*是发光体,此过程中由于C直接参与反应,故称直接化学发光。
相关词条:
冷发光 

        间接发光又称能量转移化学发光,它主要由三个步骤组成:首先反应物A和B反应生成激发态中间体C*(能量给予体);当C*分解时释放出能量转移给F(能量接受体),使F被激发而跃迁至激发态F*;最后,当F*跃迁回基态时,产生发光。


相关知识

        一个化学反应要产生化学发光现象, 必须满足以下条件: 第一是该反应必须提供足够的激发能, 并由某一步骤单独提供, 因为前一步反应释放的能量将因振动弛豫消失在溶液中而不能发光; 第二是要有有利的反应过程, 使化学反应的能量至少能被一种物质所接受并生成激发态; 第三是激发态分子必须具有一定的化学发光量子效率释放出光子, 或者能够转移它的能量给另一个分子使之进入激发态并释放出光子。

        化学发光分析测定的物质可以分为三类:第一类物质是化学发光反应中的反应物;第二类物质是化学发光反应中的催化剂、增敏剂或抑制剂;第三类物质是偶合反应中的反应物、催化剂、增敏剂等。这三类物质还可以通过标记方式用来测定其他物质,进一步扩大化学发光分析的应用范围。

         化学发光反应的发光类型通常分为闪光型(flash type)和辉光型(glow type)两种。闪光型发光时间很短,只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型,发光时间从几分钟到几十分钟,或几小时至更久。闪光型的样品必须立即测量,必须配以全自动化的加样及测量仪器。辉光型样品的测量可以使用通用型仪器,也可以配有全自动化仪器。


化学发光免疫分析

        化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。


市场分析

        化学发光定量检测相比酶联免疫是定性检测,在临床治疗上具有重大意义。以HBsAg的检测为例,如果采用化学发光法,可以将定量结果<=100IU/mL作为停药指标,并定期随访检测HBsAg定量值。

酶联免疫与化学发光的比较


酶联免疫

化学发光

原理

将医用酶同样本反应,根据反应物颜色的变化程度分析各类指标,确定诊断结果

将抗原抗体同样本结合,然后由磁珠捕捉形成的反应物,再加入发光促进剂,加大反应物自发光速度和强度,用发光信号测量仪测量光子数量,据此诊断

优点

技术成熟,成本最低

精确度高,无污染,检测速度快,技术日益成熟

缺点

操作复杂,耗时长,反应试剂残留存在放射性污染

成本相对高,技术成熟度在国内相对弱

发展方向

目前是国内主流技术,但未来逐步被化学发光替代

代表了免疫诊断的发展方向

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